העיקרון הבסיסי של סינתזת DNA

סינתזת ה-DNA הכימית מבוססת על אסטרטגיית סינתזה של שלב מוצק וכימיה של פוספורמידיט.שונה מסינתזת ה-DNA הביולוגי, החומר בסינתזת ה-DNA הכימית הוא DMT (4, 4-dimethoxytrityl) ודאוקסיריבוקסיד שעבר פוספורמידיט, כפי שמוצג באיור 1. סינתזת ה-DNA מתבצעת על התמיכה המוצקה (אנו יכולים להציע מגוון שלטור סינתזה של אוליגו), כלומר CPG (זכוכית מבוקר נקבוביות) ו-PS (פוליסטירן), וכל הסינתזה מתבצעת עלסינתיסייזר DNA/RNA, שהוא הציוד העיקרי שלנו, יש מודל שונה כגון: סינתיסייזר חד ערוץ HY, HY-12, HY-192 וכו', כיוון הסינתזה הוא מ-3' ל-5', ונוקלאוטיד מוכנס לתמיכה המוצקה באמצעות אחד מחזור סינתזה.מחזור סינתזה בדרך כלל מכיל ארבעה שלבים, ביטול הגנה, צימוד, מכסה וחמצון (איור 2).ה-Deprotection מוגדר להסרת קבוצת ה-DMT על התומך המוצק או קבוצת ההידרוקסיל 5' בנוקלאוזיד הקודם, חומצה טריכלורואצטית 3% בדיכורומתאן משמשת כמגיב לביטול ההגנה.לאחר מכן הורשה לדאוקסיריבוקסיד שעבר פוספורמידיט לחשוף את קבוצת ההידרוקסיל בעזרת אקטיבטור, כלומר 5-ethylthiotetrazole או 4,5-dicyanoimidazole, שיצרו את ה-phosphitetriester (III), ומימש את שלב הצימוד.שלב מכסה מתבצע כדי לחסום את קבוצת ההידרוקסיל שלא הגיבה במהלך שלב הצימוד, כדי למזער את היווצרותם של רצפי פגמים לא רצויים.לבסוף, הפוספיטריסטר הלא יציב (III) מחומצן לפוספורטריאסטר היציב הכימי (V) עם יוד כמחמצן בהווה של פירידין.

ה-DNA המסונתז יכול להיות מבוקע מהתמיכה המוצקה על ידי אמינוליזה, הקבוצה המוגנת 2-ציאנואתיל על הפוספורטרייסטר והאמיד על הנוקלאובאז מבוקע בו-זמנית, לוחות הסינתזה ועמודות הסינתזה במדפים ממוקמים ישירות בתא התגובה של הציוד להסרת הגנה.ניתן להכין DNA גולמי על ידי HPLC, אלקטרופורזה ו-OPC לפי דרישה, אנחנו יכולים גם לספק לך את זהציוד טיהורעבור Post-Processing.